پایان نامه برای دریافت درجه کارشناسی ارشد‹‹M.Sc.››رشته مهندسی کشاورزی علوم و صنایع غذایی- گرایش مهندسی علوم و صنایع غذایی

 عنوان

جداسازی و شناسایی سروتیپ های سالمونلاهای جدا شده از تخم مرغ های بومی و صنعتی استان مازندران با بهره گرفتن از PCR

استاد راهنما

آقای دکترحسین جلالی

استاد مشاور

آقای دکترهاتف آجودانی فر

تکه هایی از متن به عنوان نمونه :
فهرست مطالب
عنوان                                                                                                                        صفحه

چکیده   1

1. فصل اول : مقدمه و هدف

1-1. مقدمه 3
1-2. هدف . 18

1. فصل دوم : کلیات

2-1. پیشینه تحقیق 20
2-2. ساختمان و ارزش غذایی تخم مرغ. 30
2-3. نحوه نگهداری و ذخیره سازی تخم مرغ 47
2-4. انواع درجه بندی تخم مرغ. 48
2-5. مکانیسم های دفاعی تخم مرغ 48
2-6. میکروبیولوژی تخم مرغ. 52
2-7. باکتری سالمونلا 53

1. فصل سوم: مواد وروش ها

3-1. وسایل و مواد مورد استفاده 67
3-2. روش کار 69
3-2-2. آماده سازی محتویات نمونه های تخم مرغ جهت کشت باکتریایی 72
3-2-6 . مرحله تایید 74
3-2-6-3 . آزمون های سرولوژیکی 77
3-2-6-3-1 . حذف سوش های خودآگلوتینه 77
3-2-6-3-2 . آزمون برای تشخیص وجود آنتی ژن O,Vi,H 78
3-2-6-4. تفسیر نتایج واکنش های سرولوژیکی و بیوشیمیایی 78
3-2-6-5 . استفاده از واکنش زنجیره ای پلیمراز(PCR) 78
3-2-6-5-6: رسم درخت فیلوژنی. 84
3-3. روش های آماری آنالیز یافته ها 85

1. فصل چهارم: نتایج تحقیق

4-1. نتایج 85
4-1-5 . نتایج تست های بیوشیمیایی 90
4-1-6. نتایج آزمون های سرولوژیکی. 91
4-1-7. نتایج آزمون PCR 91
4-1-8 . نتایج میزان آلودگی تخم مرغ های بومی و ماشینی استان مازندران . 96
4-1-8-2. نتایج آزمون های آماری آلودگی تخم مرغ های بومی و ماشینی شهرستان ها. 96

1. فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری

5-1. بحث. 106
5-2. نتیجه گیری. 109
5-3. پیشنهادات 110
منابع  111
پیوست. 119
چکیده انگلیسی. 123
چکیده
سابقه و هدف
تخم مرغ و محصولات تخم مرغ آلوده یکی از منابع مهم بیماری های ناشی از غذا مثل سالمونلوسیس است. سالمونلوسیس یکی از عمده ترین و وسیع ترین بیماری ناشی از غذا در سرتاسر جهان است، در هر سال میلیون ها مورد انسانی در تمام دنیا گزارش می شود، و در هزاران نفر منجر به مرگ می شود. تحقیق حاضر با هدف تعیین میزان آلودگی تخم مرغ های مصرفی بومی و ماشینی استان مازندران به باکتری سالمونلا انجام شد.
روش تحقیق
در این مطالعه توصیفی مقطعی،ازاوخر فروردین91 تا اوایل مرداد91، تعداد200 عدد تخم مرغ بومی و 56 عدد تخم مرغ ماشینی از سطح استان مازندران جمع آوری و محتویات آن ها از نظر آلودگی سالمونلایی مورد بررسی قرار گرفتند. تخم مرغ های بومی و ماشینی هر یک پس از مخلوط کردن به طور جداگانه درون 45 میلی لیتر محیط پپتون واتر اضافه شدند، در ادامه بر اساس روش های کشت استاندارد عمل جداسازی صورت گرفت و بر روی تمامی باکتری های جدا شده از محیط های کشت افتراقی، آزمایشات دقیق بیوشیمیایی انجام شد، سپس جهت تشخیص قطعی سالمونلا از آزمون های سرولوژیکی و PCR استفاده شد.
یافته ها
پس از انجام مراحل کشت، از مجموع 200 عدد تخم مرغ بومی مورد بررسی، یک عدد تخم مرغ مشکوک به باکتری سالمونلا یافت شد که بعد از انجام آزمون PCR مشخص شد که متعلق به گونه سیتروباکتر فروندی است و در56 عدد تخم مرغ های ماشینی هیچ یک از تخم مرغ ها به باکتری سالمونلا آلوده نبودند، همچنین مشاهده شد که از مجموع 56 عدد تخم مرغ ماشینی3/5% تخم مرغ ها به باکتری اشرشیا و 7/1% به باکتری سیتروباکتر آلوده بودند و همچنین 5/6% تخم مرغ های بومی به باکتری اشریشیا، 5/2% به باکتری کلبسیلا، 5/1% به باکتری شیگلا و 9% به باکتری سیتروباکتر آلوده بودند.
نتیجه گیری
با توجه به نتایج بدست آمده، در هیچکدام از نمونه تخم مرغ های بومی و ماشینی مصرفی استان مازندران در این تحقیق آلودگی سالمونلایی مشاهده نشده است، ولی آلودگی محتویات تخم مرغ های بومی و ماشینی به باکتری های دیگر مشاهده شده است که لازم است اقدامات بهداشتی بیشتری در این مناطق صورت گیرد.
واژه های کلیدی: تخم مرغ ، سالمونلا، سالمونلوسیس، گاستروانتریت
1-1. مقدمه
1-1-1. خصوصیات تخم مرغ
تخم مرغ یک غذای پایه ای دارای اهمیت برای میلیون ها نفر در سرتاسر دنیا است(31). از پرزرده ترین تشکیلات یاخته تناسلی در حیوانات تخمگذار است(12). تخم مرغ به خاطر استفاده راحت یکی از پرمصرف ترین مواد غذایی مورد استفاده انسان است(12). یکی از کامل ترین منابع غذایی حیوانی برای انسان و در صورت لزوم حیوانات به شمار می رود که خلقت آن را به عالی ترین وجه و شکل ممکن بسته بندی نموده است(12).
تخم پرندگان یکی از غذاهای معمول و همچنین یکی از متنوع ترین مواد غذایی است که در آشپزی مورد استفاده قرار می گیرد و رایج ترین مورد استفاده از تخم پرندگان، تخم مرغ است. اما تخم دیگر پرنده ها مثل شترمرغ، اردک، بلدرچین نیز توسط انسان ها مصرف می شوند. تخم ها معمولا به صورت تخم با پوسته فروخته و مصرف می شوند، برای مصارف تجاری و در سرویس های آماده سازی غذاها تخم ها از پوسته شکسته می شوند و سپس ممکن است به طور کامل یا به صورت زرده و سفیده جدا مصرف شوند(66).
تخم مرغ ها یک منبع خوبی از پروتئین های با کیفیت بالا هستند. آن ها تامین کننده منابع خوبی از آهن، ویتامین ها و فسفوروزها هستند. به عنوان یک منبع مغذی از ویتامین D و در رتبه دوم بعد از روغن کبد ماهی هستند. تخم مرغ ها مقدار کلسیم کمی دارند که در پوسته یافت می شود و حاوی مقدار کمی از ویتامین C هستند(65).
تخم مرغ ها تامین کننده یک منبع مغذی متعادل و خوب برای بشر در همه سن ها هستند، زرده تخم مرغ خیلی پخته شده یک حجم مغذی بزرگی به عنوان منبع تکمیلی بالای آهن برای بچه ها است و زمانی که بچه ها به سن یک سالگی می رسند ممکن است به آن ها سفیده تخم مرغ بدهند. حجم کالری کم، قابلیت هضم آسان و حاوی مواد مغذی بالا، تخم مرغ ها را به عنوان یک ماده گرانبها در رژیم های درمانی برای افراد مسن ساخته است. در دوران نقاهت هنگامی که یک رژیم غذایی ملایم مورد نیاز است تخم مرغ ها یک رژیم غذایی مطلوب را فراهم می کنند(65).
تخم مرغ یک منبع بالقوه خوب از مواد خام برای صنایع دارویی و آرایشی است. همچنین به طور وسیعی در صنایع غذایی استفاده می شود. تخم مرغ نقش مخمر، غلیظ کننده و چسباننده مواد را داراست که از جمله در سس هایی مانند سس مایونز استفاده می شود. در سایر موارد از جمله در غذاها و در دسرهای مخصوص و در انواع کرم ها که از تنوع بالایی برخوردارند، مصرف شده و به آن ها لطافت خاصی می بخشد. در رأس همه این نقش های پنهان، این ماده غذایی به تنهایی نیز مغذی و خوشمزه است خواه به صورت آب پز، نیمرو یا به صورت انواع املت ها باشد(57).
تخم مرغ با داشتن مقدار متوازنی از غنی ترین مواد پروتئینی، چربی، کربوهیدرات، مواد معدنی، ویتامین ها طی بیست روز دوران زندگی جنینی تنها منبع تامین غذای جنین این موجود می باشد(12).